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沙門氏菌檢驗流程詳解(三)

發(fā)布時間: 2021-12-17



? ? ?選擇分離平板已經(jīng)介紹了兩個,但是情況還是很復(fù)雜,對么?莫怕莫怕,最厲害的今天出場!


今有佳人沙顯氏,

一舞劍器動四方。

觀者如山色沮喪,

天地為之久低昂。






1

HE瓊脂


HE瓊脂是中等選擇性培養(yǎng)基,其選擇性主要是三種糖,分別是乳糖、蔗糖和水楊素。沙門氏菌大部分都不利用水楊素,所以它起到和XLD瓊脂中木糖類似的作用。而高含量的乳糖利于讓腸道中發(fā)酵乳糖遲緩的菌產(chǎn)酸,方便與沙門氏菌區(qū)分。具體原理可以參考陸橋官網(wǎng)HE瓊脂。

培養(yǎng)基配制時不需要高壓滅菌,不宜過度加熱。

國標上描寫的HE瓊脂上沙門氏菌菌落特征是:藍綠色或藍色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色;有些菌株為黃色,中心黑色或呈現(xiàn)全部黑色。

與XLD瓊脂類似,前半段是典型沙門氏菌的菌落特征,包括了兩種主要的形態(tài)。后半段是非典型沙門氏菌的菌落特征。下面還是給大家展示一些實例,幫助大家在檢驗中分辨沙門氏菌。




1.1

典型的沙門氏菌


藍綠色或藍色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色。


沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)
沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)





1.2

典型沙門氏菌形態(tài)的干擾菌

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)




1.3

非典型的沙門氏菌

? ??有些菌株為黃色,中心黑色或呈現(xiàn)全部黑色。


沙門氏菌檢驗流程詳解(三)




1.4

非典型沙門氏菌形態(tài)的干擾菌

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)


從上述菌落特征可以發(fā)現(xiàn),HE瓊脂與XLD瓊脂的情況極為相似,這里不做贅述。


shamen 3

上述三種培養(yǎng)基是傳統(tǒng)的沙門氏菌選擇培養(yǎng)基,基本上都是基于一些生化指標來區(qū)分菌株,例如是否產(chǎn)硫化氫,是否利用某種糖醇。這些指標的準確性相對比較高,但是存在一些干擾菌,會形成與沙門氏菌類似的菌落形態(tài),從而影響我們的判斷。下面我來介紹一種非傳統(tǒng)原理的培養(yǎng)基。



2

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基



沙門氏菌顯色培養(yǎng)基是國標上的第四種培養(yǎng)基,是利用酶底物法,而非傳統(tǒng)生化法,對菌進行區(qū)分的培養(yǎng)基。酶與底物的結(jié)合具有特異性,所以篩選的準確性更高。再把底物連上顯色基團,從而使菌落著色,利于肉眼直接觀察酶與底物是否結(jié)合。具體原理可以參考陸橋官網(wǎng)沙門氏菌顯色培養(yǎng)基。



國標上沒有明確寫沙門氏菌在顯色培養(yǎng)基上的菌落特征,因為不同廠家用的酶底物和顯色基團不同,最后形成的菌落特征就不同。以北京陸橋的沙門顯色培養(yǎng)基為例。

我們還把之前用的菌株接種沙門顯色培養(yǎng)基,具體情況如下:




2.1

?典型的沙門氏菌


? ??? 紫紅色菌落


沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)
沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)







2.2

?典型的沙門氏菌

? ? ? 藍紫色菌落

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)




2.3

?沙門氏菌

? ? ? 藍綠色菌落和無色菌落

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)
沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)



shamen 3

從上述菌落特征可以發(fā)現(xiàn),雜菌的干擾大大降低了。在不同傳統(tǒng)平板上,只有鼠傷寒沙門氏菌始終是最典型的菌落特征。腸炎沙門氏菌、傷寒沙門氏菌豬霍亂沙門氏菌在不同傳統(tǒng)平板上總有呈現(xiàn)非最典型的情況,而在沙門顯色培養(yǎng)基上,這三種菌都是最典型的紫紅色菌落。目前,沙門顯色培養(yǎng)基上呈紫紅色菌落以外的沙門氏菌,只有發(fā)酵乳糖的亞利桑那需要特別注意,呈藍紫色,與大腸類的菌(藍綠色)容易混淆。傳統(tǒng)平板上極易造成干擾的奇異變形桿菌志賀氏菌,在沙門顯色培養(yǎng)基上呈現(xiàn)無色菌落,基本不造成干擾。所以無論從哪個方面,沙門顯色培養(yǎng)基的性能都優(yōu)于傳統(tǒng)平板。


3

選擇分離平板的總結(jié)


從上面四種培養(yǎng)基的介紹,大家可以看出:從理論上,三種傳統(tǒng)平板上任何一種菌落形態(tài)基本都有可能是沙門氏菌,因為沙門氏菌的種類太多。沙門顯色培養(yǎng)基性能更好,一些不典型菌落特征還能直接排除。但在實際工作中如果大家把每一種菌落形態(tài)都挑取鑒定,固然漏檢風(fēng)險很低,但是工作量太大。所以經(jīng)過我們上述對四種培養(yǎng)基的剖析,大家應(yīng)該明白,挑取菌落最優(yōu)的方案就是優(yōu)先挑取最典型的沙門氏菌菌落特征,之后是次典型的沙門氏菌菌落特征。如果既沒有典型的,也沒有次典型的,那么可以挑取非典型沙門氏菌菌落特征進行鑒定。

將四種培養(yǎng)基菌落形態(tài)分類如下:


沙門氏菌檢驗流程詳解(三)

平板的內(nèi)容就介紹這些了,希望對大家有幫助。下期將展開生化鑒定與血清的內(nèi)容,敬請期待。。。。





To be continued





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