俗語(yǔ)說(shuō)：“外行看熱鬧，內(nèi)行看門(mén)道”。咱們大部分人在談及分子生物學(xué)這五個(gè)大字的時(shí)候，都會(huì)覺(jué)得高深莫測(cè)，深?yuàn)W難懂，其實(shí)這種神秘只是針對(duì)科研領(lǐng)域而言，對(duì)于我們微生物檢測(cè)領(lǐng)域，倒沒(méi)有多少值得我們仰止的東西。今天，就讓小王帶你揭開(kāi)這層神秘的暗紗！
分子生物學(xué)是近代的產(chǎn)物，自1953年，沃森和克里克提出DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，標(biāo)志著分子生物學(xué)誕生。因?yàn)榉肿由飳W(xué)大多數(shù)是在DNA層面上展開(kāi)研究的，那咱就先說(shuō)下DNA：
上圖就是DNA的照片，當(dāng)然，這是模擬的，里面的球球（核糖）和棍棍（堿基，PCR中的原料）就是組成DNA的材料。它的大名就叫做：脫氧核糖核酸！而DNA就是決定生物表型的內(nèi)在因素，比如大家熟知的同卵雙胞胎，就是因?yàn)镈NA高度相似，這也是當(dāng)下親子鑒定運(yùn)用的主要依據(jù)。
又要有人問(wèn)小王了，你一直在說(shuō)DNA，那基因又是啥呢，DNA和基因是一回事兒不？
?通俗的講，DNA上包含很多基因，而基因只是DNA中的一個(gè)有效片段。就好比DNA是一條馬路，而基因則是這條馬路上的一個(gè)又一個(gè)站點(diǎn)。而生物的表型也是通過(guò)基因的形式來(lái)表現(xiàn)的。就像上面提到的同卵雙胞胎，也不是完全一樣，不一樣的地方就是因?yàn)橄嚓P(guān)的基因不一樣。
因此，大家可以看出，基因是代表一個(gè)物種所獨(dú)有的物質(zhì)，是特異性的，單獨(dú)存在的，所以，基因?qū)用娴姆治鲆餐脕?lái)對(duì)未知的物種進(jìn)行鑒定，特別是咱們微生物檢測(cè)領(lǐng)域，每個(gè)菌株的種屬間都有其特殊存在的基因，而我們只需要看未知菌株是否含有某個(gè)基因，就可以確定其是否為該菌屬。比如，新修訂的《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)》中就推出了PCR的方法，運(yùn)用PCR技術(shù)對(duì)可疑菌進(jìn)行鑒定，看其是否含有致瀉大腸埃希氏菌的毒力基因，又是屬于哪種毒力基因來(lái)進(jìn)行鑒定。
大家又要問(wèn)小王了，什么是PCR呢？
PCR從定義上是叫做聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，其實(shí)也可以認(rèn)定為是一種生化反應(yīng)過(guò)程，是指在特定的條件下，運(yùn)用聚合酶合成DNA的一種手段。那為什么要用PCR呢？下面就給大家舉個(gè)例子就知道了：
在樣品檢測(cè)中我們往往要進(jìn)行增菌，增菌的目的一是為了富集，便于檢測(cè)，二就是微生物太小，我們?nèi)庋凼强床坏降?，而增菌后就方便用肉眼觀察。劃平板劃出單菌落也是同樣的道理。而DNA更是微小不可見(jiàn)，運(yùn)用PCR技術(shù)擴(kuò)增后就可以用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)讓肉眼可以觀察到，也方便鑒定。
而在我們?nèi)粘１O(jiān)測(cè)工作中經(jīng)常還會(huì)用到比普通PCR更進(jìn)一步的方法：熒光定量PCR。從原理上講，普通PCR和熒光定量PCR在微生物檢測(cè)中檢測(cè)的基因是一致的，只是采用的方法不一樣。二者的區(qū)別在于，普通PCR需要借助凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行觀察，而熒光定量PCR可以通過(guò)儀器連接的電腦直接觀察擴(kuò)增曲線。相對(duì)來(lái)講，熒光PCR的操作更方便簡(jiǎn)單些，但設(shè)備費(fèi)用較高，而普通PCR需要擴(kuò)增和電泳后染色，才能借助成像系統(tǒng)觀察，較為麻煩。
不論是普通PCR和熒光PCR，在其反應(yīng)過(guò)程中，聚合酶的作用至關(guān)重要，其常規(guī)保存于-20℃，這就給成品試劑盒的運(yùn)輸帶來(lái)了麻煩，必須干冰運(yùn)輸才能保證試劑盒的效果。
而北京陸橋的MX系列PCR產(chǎn)品，采用國(guó)際上先進(jìn)的凍干預(yù)混技術(shù)，將聚合酶和其他反應(yīng)物質(zhì)預(yù)先凍干于反應(yīng)管內(nèi)，大大改善了產(chǎn)品的穩(wěn)定性，也使得冷藏甚至常溫運(yùn)輸變成了可能。又由于是預(yù)混液凍干，兩步操作即可上機(jī)，避免了人員在微量加液過(guò)程中的誤差，使我們的檢測(cè)過(guò)程更加穩(wěn)定可靠！
