生物素簡介
生物素又稱維生素H、輔酶R,是水溶性維生素,也屬于維生素B族,B7。它是合成維生素C的必要物質(zhì),是脂肪和蛋白質(zhì)正常代謝不可或缺的物質(zhì)。是一種維持人體自然生長、發(fā)育和正常人體機(jī)能健康必要的營養(yǎng)素。
生物素在中等強(qiáng)度的酸及中性溶液中可穩(wěn)定數(shù)日,在堿性溶液中穩(wěn)定性較差。在普通溫度下相當(dāng)穩(wěn)定,但高溫和氧化劑可使其喪失活性。
生物素檢測方法及試劑
生物素檢測依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)是GB 5009.259-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中生物素的測定》。其中,微生物檢測方法是根據(jù)植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)的生長與待測試樣中生物素的含量呈線性關(guān)系的原理,試樣透光率與標(biāo)準(zhǔn)工作曲線進(jìn)行比較, 得出待測試樣中生物素的具體含量。
陸橋公司可提供符合標(biāo)準(zhǔn)的多種形式的檢測試劑,包括傳統(tǒng)的干粉型生物素測定培養(yǎng)基(CM1407),即用型的生物素國標(biāo)即用型套裝(GVT1003)以及生物素檢測試劑盒(VT3103)。
不同產(chǎn)品在標(biāo)準(zhǔn)方法中的具體應(yīng)用匯總見表1。
表1 ?不同產(chǎn)品在標(biāo)準(zhǔn)方法中的應(yīng)用比對表
生物素檢測試劑盒中的菌球采用先進(jìn)技術(shù),將其預(yù)包埋在凍干保護(hù)劑中,使用時(shí)將其完全溶解于培養(yǎng)基中,保證活性的同時(shí)也可保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。
生物素檢測產(chǎn)品比對
為了探求國標(biāo)即用型套裝和檢測試劑盒兩種形式的產(chǎn)品,對于同一樣品檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,我們選擇了標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控樣、標(biāo)準(zhǔn)樣品奶粉進(jìn)行了比對實(shí)驗(yàn),并進(jìn)行了加標(biāo)回收驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。
? ? ? ?國標(biāo)即用型套裝和檢測試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果見圖1~圖2,不同質(zhì)控樣品比對和加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。
圖1 生物素檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線
圖2 生物素國標(biāo)即用型標(biāo)準(zhǔn)曲線
表2 ?樣品比對和加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果匯總表
比對實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
1)兩種實(shí)驗(yàn)方法,生物素含量與吸光度值均呈相關(guān)度非常高的線性關(guān)系,線性相關(guān)系數(shù)R2?均在0.99以上;
2)每個(gè)梯度的平行之間誤差范圍在10%以內(nèi),兩種產(chǎn)品對同一樣品的檢測結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%;
3)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控樣及標(biāo)準(zhǔn)樣品的測定結(jié)果均落在滿意值范圍內(nèi),且加標(biāo)回收率均在90-110%。?
因此,生物素國標(biāo)即用型套裝和生物素檢測試劑盒兩種產(chǎn)品均可用于樣品中生物素的測定。
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????在生物素檢測過程中,我們還有幾個(gè)方面需要注意:
?1、生物素容易與抗生素因子結(jié)合,且油脂會(huì)促進(jìn)植物乳桿菌的生長,因此實(shí)驗(yàn)用到的所有玻璃器皿必需嚴(yán)格處理,清洗干凈后再于180℃烘烤2h,從而去除殘留的微量生長因子。
2、國標(biāo)法樣品處理時(shí),需要NaOH調(diào)pH,回調(diào)pH值時(shí)需要使用H2SO4,不得用HCl,因?yàn)镠Cl能使生物素失去活性。
食品中生物素檢測產(chǎn)品列表
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