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GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項

發(fā)布時間: 2022-02-23

《GB 29921-2021預(yù)包裝食品中致病菌限量》于2021年11月22日實(shí)施,其中,肉制品和即食果蔬制品中致病菌指標(biāo)變化較大,刪除了大腸埃希氏菌O157:H7/NM,新增加了致瀉大腸埃希氏菌項目,引起了廣大檢驗(yàn)同行的關(guān)注!

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項


對于沒接觸過這個標(biāo)準(zhǔn)的小伙伴們來說,致瀉大腸埃希氏菌聽起來比較陌生,那就跟隨小編來一起了解下這個標(biāo)準(zhǔn)吧!


致瀉大腸埃希氏菌簡介


致瀉大腸埃希氏菌(Diarrheogenic?E. coli,DEC),是一類能引起人體以腹瀉癥狀為主的大腸埃希氏菌,可經(jīng)過污染食物引起人類發(fā)病。常見的致瀉大腸埃希氏菌主要包括腸道致病性大腸埃希氏菌EPEC、腸道侵襲性大腸埃希氏菌EIEC、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌ETEC、產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌STEC(包括腸道出血性大腸埃希氏菌EHEC)和腸道集聚性大腸埃希氏菌EAEC。


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項


致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)程序

GB4789.6-2016


選擇性增菌


樣品經(jīng)營養(yǎng)肉湯增菌后轉(zhuǎn)接到腸道菌增菌肉湯中。

? 注意

1、營養(yǎng)肉湯增菌時間為6h,時間過長會增加非目標(biāo)菌的數(shù)量;


2、腸道菌增菌肉湯的培養(yǎng)溫度為42℃,有助于抑制非腸道菌生長。


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項

五種致瀉大腸埃希氏菌及大腸埃希氏菌在腸道菌增菌肉湯中生長情況



選擇性分離



將增菌液劃線接種MAC和EMB瓊脂平板,于36℃ ± 1℃培養(yǎng)18h~24h,觀察菌落特征:

在MAC瓊脂平板上,分解乳糖的典型菌落為磚紅色至桃紅色,不分解乳糖的菌落為無色或淡粉色;

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項


在EMB瓊脂平板上,分解乳糖的典型菌落為中心紫黑色帶或不帶金屬光澤,不分解乳糖的菌落為無色或淡粉色。

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生化鑒定




GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項

DBI-09?致瀉大腸埃希氏菌干制生化鑒定試劑盒



五種致瀉大腸埃希氏菌與大腸埃希氏菌生化反應(yīng)一致,無法區(qū)分,需要通過PCR進(jìn)行進(jìn)一步確認(rèn)。


PCR確認(rèn)實(shí)驗(yàn)


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項

MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒

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陸橋五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒操作流程示意圖




GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項

五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測瓊脂糖凝膠電泳


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項

五種致瀉大腸埃希氏菌目標(biāo)條帶與型別對照表(GB4789.6-2016



根據(jù)瓊脂糖凝膠電泳中樣品DNA的擴(kuò)增條帶大小,與GB 4789.6-2016中表5(如上)進(jìn)行對照,作為最終的結(jié)果進(jìn)行報告。每次PCR反應(yīng)使用 EPEC、EIEC、ETEC、EHEC、EAEC標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陽性對照。




MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒


北京陸橋的五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒采用多重PCR技術(shù),適用于五種致瀉大腸埃希氏菌的體外核酸檢測:

01

每個反應(yīng)體系均含有大腸埃希氏菌種屬鑒定和毒力基因檢測的十二對特異性引物,一次反應(yīng)即能鑒定五種致瀉大腸埃希氏菌的型別;

02

采用國際先進(jìn)的預(yù)混凍干技術(shù),既簡化了操作(兩步即可上機(jī)),又能使產(chǎn)品可以常溫或冷藏運(yùn)輸,且保持Taq酶較高的酶活性,極大的方便了客戶的檢測工作。



檢驗(yàn)產(chǎn)品列表


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項

相關(guān)產(chǎn)品詳情可點(diǎn)擊以下查詢:


CM142?營養(yǎng)肉湯(不含糖)


CM144?腸道菌增菌肉湯(EE)


CM908B?麥康凱瓊脂?


CM105?伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)


DBI-09?致瀉大腸埃希氏菌干制生化鑒定試劑盒?


MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒?




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