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北京陸橋維生素檢測號一“陸”到底第二站——菌株篇

發(fā)布時間: 2020-11-27

北京陸橋維生素檢測號一“陸”到底第二站——菌株篇

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剛剛頒發(fā)完MVP獎杯,就有人投訴了。來自于我們可愛的菌寶寶的投訴,看來這次真的是要把獎杯撤回了,之前他們一直不愿參與評選,現在他來了別人就沒得玩了!方法就是根據人家做的,原理就是人家的特異性生長,硬核的全場MVP??!不服不行??!


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他們沒有來現場,而且一直保持著神秘,不愿和其他人有密切的聯系,我也是側面對他們有一些了解,就讓我給大家介紹一下他們吧。


他們菌寶寶家族有四個成員,老大鼠李糖乳桿菌、老二植物乳桿菌、老三萊氏曼氏乳桿菌三個細菌和老四釀酒酵母一個真菌。他們性格迥異,分別負責不同的領域,在活化和菌懸液制備上也是不盡相同。


國家標準中推薦的菌株是ATCC的菌株或同等效力的菌株,所以必須選擇權威菌種保藏中心的菌株,從生物安全的要求上還需要具有溯源性哦。


老大負責葉酸的檢測,葉酸的檢測量奠定了他老大的地位,活化培養(yǎng)基是用的比較特殊的保菌瓊脂(CM1409),他可以在這個培養(yǎng)基上傳代30代還可以使用,這個確實是很厲害的哦,其他的菌一般就是只能傳代5代以內呢。


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接種菌懸液的制備也是比較特殊,他是用的測定培養(yǎng)基+工作液作為培養(yǎng)物的,而不是全營養(yǎng)的肉湯。這就使得接種以后的菌量生長是固定的,再通過一次測定培養(yǎng)基的轉接,消耗掉菌株體內的葉酸,這種方法更加定量,使得接入的菌數更加明確。也會因為接菌帶入的葉酸更少,使得實驗的本底值更小。


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老二能力最大,負責的項目涉及生物素、煙酸和泛酸。生物素必須親力親為。煙酸和泛酸位居第二位,雖然主戶們都不喜歡用他進行檢測,但是在國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細則中,嬰幼兒配方乳粉中泛酸的檢測點名是讓老二來做的,國家權威誰敢不服。


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他的菌懸液制備相對比較簡單,使用全營養(yǎng)的肉湯培養(yǎng)以后直接離心洗滌,在進行濃度調整即可使用。老三負責維生素B12的檢測,它最為嬌氣,活化難度較大,最好是進行厭氧培養(yǎng),或者使用固體培養(yǎng)基進行穿刺培養(yǎng),會更好的保持活性。穿刺使用的是10μL的接種環(huán)不是接種針哦,這樣等菌長出來以后,可以直接再用接種環(huán)沿穿刺線插入再拔出,直接接種肉湯培養(yǎng)就可以用于制備接種菌懸液了。


老四是家族中唯一一個真菌,負責肌醇的檢測,該項目一般都是用第二法氣相方法檢測的,也有很多專家呼吁把第二法提為第一法,所以老四也一直是家族中最不受待見的。偶爾會有主戶拿他來做兩次檢測。


真菌活潑皮實一些,但是一定要記得用麥芽浸粉瓊脂培養(yǎng)它哦,培養(yǎng)溫度也不一樣是30℃哦。他的菌懸液制備也是比較簡單,直接從平板上調菌制備透光率為60%~80%的懸液就好。要記得檢測過程中要全程使用振蕩培養(yǎng)箱哦,振蕩速度為約140次/min~160次/min。


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