1.T-2毒素簡(jiǎn)介

T-2毒素和HT-2毒素屬于單端孢霉烯族毒素，該族毒素種類(lèi)接近190種。根據(jù)該毒素化學(xué)結(jié)構(gòu)中C3和C15之間是否存在大環(huán)，以及羥基和乙酸基數(shù)量，可以分為A、B、C、D共4類(lèi)。T-2毒素是A類(lèi)單端孢霉烯族毒素中毒性最強(qiáng)的一種真菌毒素，HT-2毒素為T(mén)-2毒素在體內(nèi)與體外最為主要的代謝產(chǎn)物，二者在自然界中分布廣泛。此外，T-2毒素和HT-2毒素還可存在于各類(lèi)谷物、人類(lèi)食品、動(dòng)物飼料及動(dòng)物制品中。T-2毒素可以通過(guò)污染飼料對(duì)家畜造成危害，引起動(dòng)物拒食、嘔吐、腹瀉、胃腸道出血等癥狀。T-2毒素具有很強(qiáng)的免疫毒性，感染動(dòng)物后可引起免疫機(jī)能下降。

圖1??T-2毒素結(jié)構(gòu)式

2.?T-2毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)

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我國(guó)飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB 13078-2017中飼料原料和飼料產(chǎn)品中T-2毒素的含量規(guī)定如下：

3.酶聯(lián)免疫法檢測(cè)T-2毒素

定量檢測(cè)原理基于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）。酶標(biāo)板微孔包被有T-2毒素特異性抗體，T-2毒素標(biāo)準(zhǔn)品或樣品以及T-2毒素-HRP酶結(jié)合物（檢測(cè)溶液）加入包被有抗體的微孔中。T-2毒素-HRP酶結(jié)合物與標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中的T-2毒素競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合T-2毒素抗體。未結(jié)合的T-2毒素-HRP酶結(jié)合物在洗滌步驟中洗去。加入底物溶液后，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。加入終止液終止反應(yīng)，藍(lán)色物質(zhì)變成黃色。450nm下測(cè)定吸光值，吸收光的強(qiáng)度與樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中T-2毒素的濃度成反比。

圖2 ?B4196?T-2毒素試劑盒

4.?Symmetric?側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l檢測(cè)T-2毒素

定量側(cè)向?qū)游鰴z測(cè)基于免疫層析測(cè)定原理。微孔中有耦合在膠體金上的T-2毒素抗體。在微孔中加入待測(cè)液，反復(fù)吹打形成懸浮混合液后開(kāi)始孵育。在孵育過(guò)程中，T-2毒素（若存在）與膠體金抗體結(jié)合，達(dá)到抑制檢測(cè)線顯色的效果。將試紙條插入混合液中，液體沿試紙條垂直向上層析并層析至檢測(cè)區(qū)（檢測(cè)區(qū)內(nèi)有控制線和檢測(cè)線）。測(cè)試有效時(shí)，上方的控制線會(huì)顯色。檢測(cè)線的顏色深淺與樣品中T-2毒素濃度成反比。通過(guò)使用 S-Flow 軟件及對(duì)稱(chēng)定量技術(shù)可以準(zhǔn)確測(cè)定T-2毒素的濃度。

圖3 ?S-FLOW讀數(shù)儀

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