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真菌毒素檢測技術(shù)——玉米赤霉烯酮篇

發(fā)布時間: 2019-09-24

真菌毒素檢測技術(shù)——玉米赤霉烯酮篇



1.??? 玉米赤霉烯酮簡介? ?


玉米赤霉烯酮(Zearalenone)又稱F-2毒素,它首先從有赤霉病的玉米中分離得到。玉米赤霉烯酮其產(chǎn)毒菌主要是鐮刀菌屬(Fusarium)的菌株,如禾谷鐮刀菌(F.graminearum)和三線鐮刀菌(F.tricinctum)、黃色鐮孢(Fusarium culmorum)、木賊鐮孢(Fusarium equiseti)、半裸鐮孢(Fusarium sernitectum)、茄病鐮孢(Fusarium solani)等菌種。玉米、燕麥、小米、大米、小麥、大麥等谷物是玉米赤霉烯酮的主要污染對象,尤其是那些遭到冰雹過后的玉米。玉米赤霉烯酮具有較強(qiáng)的耐熱性,還具有可在生殖系統(tǒng)上起作用的雌激素作用,能同時使家禽、實驗小鼠及家畜產(chǎn)生激素亢進(jìn)癥。孕婦食用的食品中若含有玉米赤霉烯酮將會引起畸形、死胎及流產(chǎn)。用于制作各種面食的面粉中若含有玉米赤霉烯酮,將會對被食用者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生中毒癥狀,如頭痛、惡心及神經(jīng)抑郁等。


2、玉米赤霉烯酮的限量標(biāo)準(zhǔn)


《GB2761-2017食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》食品中玉米赤霉烯酮限量為60μg/kg。

真菌毒素檢測技術(shù)——玉米赤霉烯酮篇


3、 酶聯(lián)免疫法檢測玉米赤霉烯酮? ????


定量檢測原理基于酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)。酶標(biāo)板微孔包被有玉米赤霉烯酮特異性抗體,玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)品或樣品以及玉米赤霉烯酮-HRP酶結(jié)合物(檢測溶液)加入包被有抗體的微孔中。玉米赤霉烯酮-HRP酶結(jié)合物與標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中的玉米赤霉烯酮競爭結(jié)合玉米赤霉烯酮抗體。未結(jié)合的玉米赤霉烯酮-HRP酶結(jié)合物在洗滌步驟中洗去。加入底物溶液后,產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。加入終止液終止反應(yīng),藍(lán)色物質(zhì)變成黃色。450nm下測定吸光值,吸收光的強(qiáng)度與樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中玉米赤霉烯酮的濃度成反比。


真菌毒素檢測技術(shù)——玉米赤霉烯酮篇


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4、Symmetric?側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l檢測玉米赤霉烯酮


定量側(cè)向?qū)游鰴z測基于免疫層析測定原理。微孔中有耦合在膠體金上的玉米赤霉烯酮抗體。在微孔中加入待測液,反復(fù)吹打形成懸浮混合液后開始孵育。在孵育過程中,玉米赤霉烯酮(若存在)與膠體金抗體結(jié)合,達(dá)到抑制檢測線顯色的效果。將試紙條插入混合液中,液體沿試紙條垂直向上層析并層析至檢測區(qū)(檢測區(qū)內(nèi)有控制線和檢測線)。測試有效時,上方的控制線會顯色。檢測線的顏色深淺與樣品中玉米赤霉烯酮濃度成反比。通過使用 S-Flow 軟件及對稱定量技術(shù)可以準(zhǔn)確測定玉米赤霉烯酮的濃度。


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