最近,檢測圈的一個(gè)傳聞引起檢測大神們的瘋狂討論—沙門氏菌在VRBA內(nèi)的菌落是紅色的!從原理上來說,這是不可能的!從傳聞來看,又像是真實(shí)存在的!為了破解這個(gè)謎題,我們做了相關(guān)的驗(yàn)證試驗(yàn)。
首先我們要了解一下VRBA培養(yǎng)基的成分及沙門氏菌的生化特性。
VRBA及沙門氏菌生化原理剖析
先來看VRBA培養(yǎng)基的組成成分(圖1)及原理:
圖1? VRBA的組成成分
VRBA培養(yǎng)基中含有乳糖和中性紅。大腸菌群可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,引起pH值的變化,中性紅作為酸堿指示劑使菌落變紅;酸與膽鹽結(jié)合形成膽酸鹽沉淀,故菌落周圍會有紅色的膽酸鹽沉淀環(huán)。
所以大腸菌群菌落變紅是由于發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸導(dǎo)致的!
了解了菌落變紅的原理,我們再來看一下沙門氏菌的生化特性:
圖2? 三糖鐵試驗(yàn)結(jié)果
從三糖鐵的試驗(yàn)結(jié)果(圖2)看,沙門氏菌不能利用乳糖,只能利用葡萄糖,而VRBA 的成分中并沒有葡萄糖!從原理上分析,沙門氏菌在VRBA上不會形成紅色菌落。所以傳聞會是真的么?
試驗(yàn)驗(yàn)證
?首先,我們采用涂布法,在VRBA表面接種沙門氏菌。結(jié)果發(fā)現(xiàn),沙門氏菌在VRBA表面呈現(xiàn)大的無色菌落(圖3)。這符合沙門氏菌的特征,沙門氏菌一般不發(fā)酵乳糖,但在有氧條件下分解蛋白胨產(chǎn)堿,所以在VRBA表面形成大的無色菌落。
?燃鵝,我們繼續(xù)采用傾注法,在VRBA內(nèi)部接種沙門氏菌。結(jié)果發(fā)現(xiàn),沙門氏菌在VRBA內(nèi)部形成的小小菌落(圖4)竟然是紅色的!紅色的!!紅色的?。。?/span>
? 為此我們做了原料的排查試驗(yàn),采用去掉酵母浸粉成分的VRBA,以傾注法接種沙門氏菌。結(jié)果發(fā)現(xiàn),沙門氏菌在VRBA內(nèi)部形成小菌落是無色的了(圖5黃圈里的菌落)。
圖3? 腸炎沙門氏菌ATCC13076涂布接種
圖4? 腸炎沙門氏菌ATCC13076傾注接種
圖5? 腸炎沙門氏菌ATCC13076傾注接種去掉酵母粉后的VRBA
酵母浸粉含糖是正常的么?
圖6? 各品牌的比對試驗(yàn)
? ? ??至此,所有的疑問都已解開。原來沙門氏菌真的會在VRBA內(nèi)部形成紅色菌落,但在大部分品牌VRBA上沙門氏菌菌落很小,與典型大腸菌群還是比較好區(qū)分的,且BGLB驗(yàn)證時(shí)很容易排除。
參考文獻(xiàn)
1、Difco&BBL Mannal: Second Edition【M】United States of America, 2009
2、張曉桐等,酵母提取物提取工藝及應(yīng)用的研究進(jìn)展【J】中國調(diào)味品,2019,002(044):160-163
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