用途:
用于彎曲菌的馬尿酸鈉水解實(shí)驗(yàn)。
原理:
?? ? ??由于細(xì)菌具有馬尿酸鈉水解酶,可以將馬尿酸鈉水解為甘氨酸與苯甲酸,甘氨酸與茚三酮反應(yīng),生成紫色化合物。
用法:
1、配制磷酸鹽緩沖液(PBS)。
?磷酸鹽緩沖液(PBS)組分:
?氯化鈉? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?8.5g
?磷酸氫二鈉? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?8.98g
?磷酸二氫鈉? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?2.71g
?蒸餾水? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??1000mL
?2、將0.1g馬尿酸溶于10mL磷酸鹽緩沖液(PBS)中。過(guò)濾除菌,無(wú)菌條件下,分裝成每管0.4mL。儲(chǔ)存于-20℃。
?3、挑取大量菌落于0.4mL 1%馬尿酸鈉管中,混勻,36℃±1℃水浴2h或36℃±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)4h。觀察結(jié)果時(shí),滴加3.5%茚三酮溶液2~3滴,不要振蕩,再放入36℃±1℃水浴鍋中或培養(yǎng)箱中溫育10min,觀察結(jié)果。出現(xiàn)深紫色為陽(yáng)性,不變色為陰性。
注意事項(xiàng):
1、使用新鮮的菌做此實(shí)驗(yàn),并且接種量要大,否則可能出現(xiàn)假陰性。
2、觀察結(jié)果需使用茚三酮溶液,茚三酮溶液避光冷藏保存不超過(guò)7天。
3、觀察結(jié)果在10~15min內(nèi),否則可能出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。
保存條件及效期:
2℃-8℃避光保存兩年。
質(zhì)控結(jié)果: