用途:
用于霍亂弧菌的生化鑒定。(SN標(biāo)準(zhǔn))
配方:(g/L)
牛肉粉 | 3.0 |
?蛋白胨 | 15.0? |
乳糖 | 5.0? |
硫酸亞鐵 | 0.2? |
硫代硫酸鈉 | 0.30? |
酚紅 | 0.024? |
酵母粉 | 3.0? |
蛋白胨 | 5.0? |
葡萄糖 | 1.0? |
氯化鈉 | 20.0? |
瓊脂 | 12.0? |
附加試劑:
????無(wú)
原理:
牛肉粉、酵母粉、?蛋白胨、蛋白胨在培養(yǎng)基中作為基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供菌體細(xì)胞生長(zhǎng)所需的氮源、碳源、維生素等;雙糖(乳糖、葡萄糖)為可發(fā)酵的碳源,細(xì)菌代謝其產(chǎn)酸產(chǎn)氣等;硫酸亞鐵及硫代硫酸鈉分別作為產(chǎn)硫化氫的指示劑和底物;高含量氯化鈉可滿足弧菌生長(zhǎng)嗜鹽的要求同時(shí)可以抑制不耐鹽的細(xì)菌生長(zhǎng);酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。
在該培養(yǎng)基上可以觀察到三種基本的發(fā)酵類型:①僅發(fā)酵葡萄糖:斜面呈紅色(堿)/底層呈黃色(酸)。斜面呈紅色,說(shuō)明葡萄糖被利用,培養(yǎng)18h-24h后,低濃度(0.1%)的葡萄糖完全被利用了,細(xì)菌開始利用培養(yǎng)基中的蛋白胨作為生長(zhǎng)的養(yǎng)料。蛋白胨分解釋放氨,同時(shí)葡萄糖分解產(chǎn)生的酸部分揮發(fā),最終在培養(yǎng)基斜面中顯出堿性pH反應(yīng)(紅色),然而在培養(yǎng)基底部,由于氧張力較低,分解葡萄糖產(chǎn)生的酸未揮發(fā)仍在底部保持酸性反應(yīng)(底部呈黃色);②同時(shí)發(fā)酵葡萄糖和乳糖:斜面呈黃色(酸)/底層呈黃色(酸):葡萄糖和乳糖均被利用,由于乳糖的量較大,18h-24h內(nèi),仍有部分乳糖未分解完,斜面仍然呈酸性反應(yīng)(黃色);③均不發(fā)酵葡萄糖和乳糖:由于僅利用蛋白胨產(chǎn)堿使斜面和底部均呈紅色。
該培養(yǎng)基另一個(gè)鑒別系統(tǒng)是細(xì)菌產(chǎn)硫化氫指示劑,第一步細(xì)菌在酸性環(huán)境下利用培養(yǎng)基中的無(wú)機(jī)鹽硫代硫酸鈉產(chǎn)生硫化氫氣體,該氣體是一種無(wú)色氣體,它與培養(yǎng)基中另外一種無(wú)機(jī)鹽硫酸亞鐵種的亞鐵離子反應(yīng)生成黑色不容性物質(zhì)硫化亞鐵。因此細(xì)菌產(chǎn)硫化氫可由培養(yǎng)基變黑判斷。此外,由于黑色硫化亞鐵沉淀可以掩蓋在底部產(chǎn)生的酸性反應(yīng),但由于硫化氫生成需要在酸性環(huán)境下進(jìn)行,因此產(chǎn)生了硫化氫,即使酸性反應(yīng)未被觀察到,也是存在的。
用法:
稱取64.5g于1L蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝,121℃高壓滅菌15min,制成高層斜面?zhèn)溆谩?/span>
注意事項(xiàng):
????無(wú)
培養(yǎng)基質(zhì)控:?