用途:
用于細(xì)菌的動力、吲哚和脲酶復(fù)合生化實(shí)驗(yàn)。
配方:(g/L)
蛋白胨 | 28.0 |
磷酸二氫鉀 | 1.0? |
酚紅 | 0.005? |
酪胨 | 2.0? |
氯化鈉 | 5.0? |
瓊脂 | 4.0? |
附加試劑:
40%尿素溶液????????????????????????????50mL/L
Kovacs靛基質(zhì)試劑
原理:
蛋白胨和酪胨提供碳氮源、維生素和生長因子;磷酸二氫鉀是緩沖劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓;酚紅是酸堿指示劑;瓊脂是凝固劑。
動力實(shí)驗(yàn):檢驗(yàn)細(xì)菌的動力,穿刺接種培養(yǎng)基后,如果細(xì)菌沿穿刺線擴(kuò)散生長即為陽性,反之為陰性。
吲哚實(shí)驗(yàn):細(xì)菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成的吲哚可與對二甲基氨基苯甲醛結(jié)合,形成玫瑰吲哚,為紅色化合物。細(xì)菌培養(yǎng)后,滴加靛基質(zhì)試劑后,顯紅色的是陽性,不變色的為陰性。
脲酶實(shí)驗(yàn):細(xì)菌能分解尿素的可使培養(yǎng)基pH升高,酚紅是酸堿指示劑,pH升高后培養(yǎng)基整體變紅,為陽性,反之為陰性。
用法:
1、稱取40.0g于1L蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15min。
2、冷卻至55℃,無菌加入50mL40%的尿素溶液,混勻,分裝試管后備用。
注意事項(xiàng):
培養(yǎng)基基礎(chǔ)冷卻至55℃左右,加入附加試劑,避免溫度過高,附加試劑失效。
培養(yǎng)基質(zhì)控:
觀察動力試驗(yàn)結(jié)果:滴加2-3滴甲基紅試劑,立刻觀察,出現(xiàn)紅色為陽性,不變色為陰性;
觀察吲哚試驗(yàn)結(jié)果:滴加Kovacs靛基質(zhì)試劑,10min-30min內(nèi)觀察結(jié)果,出現(xiàn)紅色為陽性,不變色為陰性。如為陰性應(yīng)放在36℃±1℃繼續(xù)培養(yǎng)4h后再觀察。
觀察脲酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果:培養(yǎng)基整體變玫紅則為陽性,反之為陰性