用途:
生化培養(yǎng)基,用于細(xì)菌KCN抑制試驗(yàn)。 ?
配方:(g/L)
蛋白胨 | 10.0 |
磷酸氫二鈉 | 5.64? |
氯化鈉 | 5.0? |
磷酸二氫鉀 | 0.225? |
附加試劑:
????0.5%氰化鉀溶液? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??20mL/L
原理:
蛋白胨作為基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供一般細(xì)菌生長(zhǎng)所需的碳源、氮源和其他的營(yíng)養(yǎng)元素;氯化鈉維持細(xì)胞正常生長(zhǎng)所需要的滲透壓;磷酸鹽作為緩沖劑;氰化鉀能抑制呼吸酶,特別是細(xì)胞色素氧化酶最為敏感,氰離子能與氧化型細(xì)胞色素氧化酶中的三價(jià)鐵結(jié)合,阻止其還原成二價(jià)鐵,從而使傳遞電子的氧化過(guò)程中斷,造成細(xì)胞內(nèi)窒息。
用法:
1、稱(chēng)取2.1g于100mL蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15min。
2、冷卻后無(wú)菌加入0.5%氰化鉀溶液2mL作為試驗(yàn),分裝于無(wú)菌試管中備用。
注意事項(xiàng):
1、?氰化鉀為劇毒,實(shí)驗(yàn)操作要做好防護(hù),避免皮膚接觸和吸入。
2、?接種時(shí)以不添加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對(duì)照。
3、?接種后需要覆蓋液體石蠟,防止氰化鉀揮發(fā),造成濃度降低出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
培養(yǎng)基質(zhì)控: