用途:
用于細(xì)菌的賴氨酸、吲哚和動力復(fù)合生化試驗(yàn)。
配方:(g/L)
蛋白胨 | 12.8? |
酵母粉 | 3.0? |
葡萄糖 | 1.0? |
L-賴氨酸鹽酸鹽 | 10.0? |
L-色氨酸 | 0.5? |
溴甲酚紫 | 0.02? |
瓊脂 | 2.7? |
附加試劑:
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑
原理:
蛋白胨、酵母粉在培養(yǎng)基中作為基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)提供碳源,氮源,維生素及礦質(zhì)元素;L-色氨酸作為色氨酸水解酶的底物;葡萄糖作為可發(fā)酵的碳源能促進(jìn)菌體細(xì)胞的生長;L-賴氨酸鹽酸鹽作為氨基酸酶代謝的底物;溴甲酚紫作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑
細(xì)菌代謝產(chǎn)生的色氨酸酶,水解色氨酸產(chǎn)生吲哚(又名靛基質(zhì)),吲哚本身沒有顏色,在加入對二甲氨基苯甲醛試劑后,與之作用生成分子結(jié)構(gòu)為醌型的玫瑰紅色物質(zhì)。
某些細(xì)菌在L-賴氨酸存在的情況下,誘導(dǎo)產(chǎn)生賴氨酸脫羧酶使L-賴氨酸脫羧,產(chǎn)生一種二胺的化合物——尸胺,該物質(zhì)在厭氧的條件下穩(wěn)定,由于氨基酸脫羧,使得培養(yǎng)基的pH值升高(克服培養(yǎng)基本身的酸性pH條件及代謝葡萄糖產(chǎn)生的酸),使得培養(yǎng)基中的顏色變成紫色,而不產(chǎn)賴氨酸脫羧酶的細(xì)菌由于代謝葡萄糖產(chǎn)酸使得培養(yǎng)基顏色變成黃色。
用法:
稱取30.0g于1L蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝于小試管中,每管5mL,121℃高壓滅菌15min,制成高層斜面?zhèn)溆谩?/span>
注意事項(xiàng):
無
培養(yǎng)基質(zhì)控:
觀察吲哚試驗(yàn)結(jié)果:滴加靛基質(zhì)試劑2-3滴,立即觀察結(jié)果。出現(xiàn)紅色為陽性,不變色為陰性。
觀察賴氨酸脫羧酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果:紫色為陽性,黃色為陰性。
觀察動力試驗(yàn)結(jié)果:穿刺線周圍培養(yǎng)基有混濁生長為陽性,否則為陰性。