全球每年由沙門氏菌引起的胃腸炎病例約有九千多萬例，導致約20萬人死亡，其中85%病例是食源性的，常居食物中毒榜首。因此，腸桿菌科的沙門氏菌是一類重要的、全球性的人畜共患的食源性致病菌，其檢測在畜禽健康、人類公共安全及食品安全等方面意義重大。
隨著技術(shù)的進步，沙門氏菌鑒定雖然有多種新鑒定手段，如免疫學、分子生物學、基于細胞物理/化學特征的檢測技術(shù)、生物傳感器等檢測技術(shù)，但目前限制最少、應用最廣泛的還是傳統(tǒng)的檢測技術(shù)，以形態(tài)學觀察、培養(yǎng)特征、生理生化特征、抗原特征的鑒別為主。
傳統(tǒng)檢測技術(shù)條件簡單、技術(shù)成熟、假陽性率低，但存在檢測時間長，準確度受操作人經(jīng)驗判斷和菌活性影響等缺點，而沙門氏菌屬包含2個種，含6個亞種，2579個血清型，具有多種生化組合特征，其生理生化特征鑒定受人員經(jīng)驗判斷和菌活性影響最大，這也是沙門氏菌屬傳統(tǒng)生化鑒定的一大難點。
下面我們就沙門氏菌屬傳統(tǒng)生化鑒定流程、商品化試劑盒的使用，沙門菌及常見干擾菌生化鑒定現(xiàn)象，常見問題來為您解析這一操作步驟。
01?? 沙門氏菌屬傳統(tǒng)生化鑒定 流程
為幫助大家理順流程，我們依據(jù)GB4789.4-2016標準，將沙門氏菌屬的生化鑒定判定步驟簡化如下圖：
流程??
其中，必須用到的生化試劑有五種：
三糖鐵瓊脂、賴氨酸脫羧酶、靛基質(zhì)、尿素、氰化鉀。
可能用到的生化試劑有三種：
甘露醇、山梨醇、ONPG
?測試中分離的可疑單菌落經(jīng)純化后，每個菌株測試一組，以確認該菌是否為沙門氏菌屬。
02? 沙門氏菌傳統(tǒng)生化鑒定商品化試劑盒 操作
為更方便、快速地完成沙門氏菌屬的系列生化鑒定并判定，我們可以選購商品化套裝生化試劑盒。
下面，我們以陸橋DBI-05沙門氏菌干制生化鑒定試劑盒操作視頻為大家演示：
https://v.qq.com/x/page/m3202nftgzu.html
視頻指路牌：
經(jīng)過培養(yǎng)、滴加附加試劑后，按下表判斷各項生化試劑結(jié)果：
然后，參照01沙門氏菌屬傳統(tǒng)生化鑒定流程部分，判斷該菌是否為沙門氏菌。
03? 沙門氏菌及常見干擾菌生化鑒定 結(jié)果
典型（完全符合A1組合結(jié)果）的沙門氏菌生化結(jié)果為：
其他常見沙門及干擾菌生化結(jié)果見下表：
04? 沙門氏菌傳統(tǒng)生化鑒定 常見問題
在沙門氏菌傳統(tǒng)生化鑒定過程中，我們還可能會遇到以下常見問題：
Q1：在三糖鐵實驗中，菌株產(chǎn)硫化氫變黑覆蓋了斜面底層的顏色，該如何判定底層產(chǎn)酸還是產(chǎn)堿？
A1：測試菌株產(chǎn)硫化氫，可判定底層產(chǎn)酸變黃。
為更好地觀察判定，可①減少接種量（先斜面劃線，再留少量菌進行穿刺，注意不要穿刺到底部）；②縮短培養(yǎng)時間（8h-18h）。
此外，還需要注意封膜保濕，防止斜面干縮導致結(jié)果誤判。
Q2：生化鑒定使用的菌懸液濁度要求多少？
A2：生化鑒定套裝為微量鑒定系統(tǒng)，對于菌懸液濃度有要求，使用0.5麥氏濁度進行接種，菌懸液濃度過大或者過小對實驗結(jié)果的準確度有影響。
Q3：尿素酶變淺橙色，如何判定是陰性還是陽性？
A3：尿素酶黃色或橙色均判定為陰性，只有玫紅色或紅色才判定為陽性。
還有更多干制生化套裝，歡迎您的關(guān)注和來電咨詢。
參考文獻
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