哺乳動物攝入黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1)污染的食品或飼料后,其乳汁中會檢測到黃曲霉毒素M1 ( Aflatoxin M1 ),自2002年以來,已被列為I類致癌物。酸奶和奶酪由于具有較高的營養(yǎng)價值和豐富的口感因此也越來越受到消費者的歡迎,酸奶和奶酪中黃曲霉毒素M1的檢測也備受關(guān)注。
下面帶大家了解一下希臘普格的黃曲霉毒素M1 ES試劑盒(貨號B2096),為酸奶和奶酪樣品中黃曲霉毒素M1提供便捷的檢測解決方案。
酸奶是以牛奶為原料,經(jīng)過巴氏殺菌后再向牛奶中添加有益菌,經(jīng)發(fā)酵后,再冷卻灌裝的一種牛奶制品。由于其酸度高pH值較低,常見的處理方法是用堿性溶液(如:1?mol/L?NaOH)將樣品調(diào)pH值至中性后再進行檢測。但是由于種類多:如酸乳、發(fā)酵乳、風味酸乳、風味發(fā)酵乳等等;添加成分多:如白砂糖、果粒、蛋白粉、食品添加劑等等。不同種類的酸奶樣品處理起來會略顯繁瑣。
有沒有簡便的操作方法呢?當然有。普格的試劑盒提供了一種特殊的酸奶緩沖液(Yogurt Buffer),我們按照酸奶質(zhì)地不同分成兩類分別進行前處理:一類是質(zhì)地較稀的液態(tài)酸奶,用酸奶緩沖液按照1:0.5的比例混合(1.5倍稀釋);另一類是質(zhì)地較稠的固態(tài)酸奶,用酸奶緩沖液按照1:1的比例混合(2倍稀釋)。樣液渦旋混合均勻后就可以直接用ELISA試劑盒檢測了。酸奶緩沖液的主要作用是調(diào)節(jié)樣品pH值、稀釋樣品和排除非特異性干擾,可以大大提高實驗的工作效率并提高檢測的準確性。
圖2 酸奶緩沖液
需要注意的是:(1)酸奶由于粘稠、掛壁、堵吸頭等特點不適合用移液器吸取,我們可以采用稱量的方式取樣;(2)處理后的酸奶溶液直接檢測,不需要離心;(3)最終計算結(jié)果應(yīng)乘以不同的稀釋倍數(shù)。
圖3 酸奶緩沖液處理酸奶樣品
奶酪是牛奶經(jīng)濃縮、發(fā)酵而成的奶制品,近似為固體食物。通常用有機溶劑(如二氯甲烷、甲醇或乙腈)提取,離心轉(zhuǎn)移有機溶劑用氮流蒸發(fā)裝置濃縮有機溶劑,再用緩沖液復(fù)溶殘留物后檢測,有時還需要用正己烷做油脂的脫脂凈化。提取方法需要用到多種有機溶劑、氮流蒸發(fā)裝置、通風裝置等等,整個操作不僅用到的儀器設(shè)備多,耗時也長。相比之下,用普格試劑盒提供的奶酪提取緩沖液(Cheese Extraction Buffer)進行處理操作就簡單多了。
圖4 有機試劑提取法--
氮流蒸發(fā)甲醇和正己烷脫脂
我們用到的奶酪提取緩沖液是4倍濃縮液,使用前先用去離子水稀釋成1×奶酪提取緩沖液,然后再進行樣品處理。
圖5 奶酪提取緩沖液
圖6?奶酪提取緩沖液處理奶酪樣品
圖7 奶酪樣品前處理流程圖
奶酪提取緩沖液可以使奶酪在加熱的環(huán)境下充分溶解在緩沖液中,形成乳懸濁液,適用于奶酪、黃油等乳酪類制品的黃曲霉毒素M1的提取。
需要注意的是:(1)奶酪樣品研磨或粉碎時需去除表面非食用部分,顆粒越小溶解越充分;(2)溶解后的樣液靜置分層,吸取中間層檢測;(3)最終計算結(jié)果應(yīng)乘以不同的稀釋倍數(shù)。
酸奶緩沖液(Yogurt Buffer)和奶酪提取緩沖液(Cheese Extraction Buffer)這兩種緩沖液可以與希臘普格黃曲霉毒素M1 ES試劑盒(貨號B2096)配套使用。酸奶樣品和奶酪樣品經(jīng)前處理后,提取液可以直接用于試劑盒的檢測。
希臘普格生物技術(shù)有限公司(ProGnosis)是歐洲著名的生物技術(shù)公司,一直致力于乳品、糧油與飼料領(lǐng)域多種真菌毒素精確定量快速檢測、乳品摻假以及食品過敏原快速檢測產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)。
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以上就是本期分享的酸奶和奶酪樣品的檢測方法,該方法簡便易行,所需儀器設(shè)備簡單,檢測結(jié)果準確度高。如果您還對其他乳制品如奶油、煉乳、淡奶等樣品的黃曲霉毒素M1檢測感興趣,歡迎聯(lián)系我們。我們持續(xù)為乳制品企業(yè)提供優(yōu)質(zhì)、準確、穩(wěn)定、高效的檢測方案和檢測產(chǎn)品。